عمومية
Immunofixation هو اختبار معملي يسمح بتحديد وكتابة الجلوبيولينات الغاما الموجودة في عينة بيولوجية.
بالتفصيل ، يسمح التحليل بدراسة - في الدم أو في بول المريض - فصول الجلوبولينات المناعية (IgA ، IgG ، IgM ، IgE أو IgD) ونوع كابا خفيف السلسلة أو لامدا ، وفقا لحركتهم الكهربي محددة . في وقت لاحق ، من أجل تحديد أي غلوبولين غاما ، يشمل التننيع التحصيلي لمستضدات معينة للجزء أو الجسم المضاد المقابل (مضاد مضاد الغلوبولين المناعي ): يتم تأكيد وجود التغير المشتبه به من خلال التكوين من راسب ، مرئية للعين المجردة أو تحت المجهر.
هذه المعلومات ذات أهمية كبيرة لإنشاء ، على وجه الخصوص ، تشخيص أمراض خلايا البلازما (اعتلال gammopathies أو خلل في البلازما خلية). من المفيد جدا لمرضي تقييم ورصد الورم النخاعي المتعدد ، Waldenström macroglobulinemia والاميلويد الابتدائي (وتسمى أيضا داء النشوانيات سلسلة خفيفة).
ما
إن التثبيط المناعي (أو الاختصار المناعي ، والذي يُختصر أيضًا إلى IFE المختصر) هو أسلوب يمكن أن يحدد ما إذا كانت أي فئة من الغلوبولينات المناعية (IgG ، IgM ، IgA ، IgD ، IgE) أو نوع الكابا ذات السلسلة الخفيفة أو اللامدا الزائدة أو الخلل في مصل الدم وفي بول المريض.
السلاسل الخفيفة كابا و lambda تميز المكون أحادي النسيلة ، أي الأجسام المضادة مع نفس التركيب الكيميائي نفسه.
الهلام والمناعة المناعية البولية: متى يشار إليه؟
اعتلال خلقي خلقي خلقي أو اعتلال عضلي هي مجموعة غير متجانسة من الاضطرابات ، من المسببات غير المعروفة ، تتميز:
- انتشار نسخة من الخلايا البائية غير متناسب .
- التواجد في مصل الدم و / أو البول من نوع من الغلوبولين المناعي (أو وحدته المتعددة الببتيدات) ، متجانسة هيكليا و electrophoretically ( وحيدة النسيلة ).
عادة ، يتم تشخيص خلل التنسج الخلوي في البلازما باستخدام رحلان الكهربائي في مصل الدم والبول ، تليها immunofixation المصلية (IFE).
في الوقت نفسه ، يمكن وصف اختبار الدم لقياس تركيز الغلوبيولين المناعي الكلي (IgG + IgM + IgA).
لمعرفة المزيد: الجلوبولينات المناعية - ما هي ، كيفية قياسها وقيمها المرجعية »Immunofixation: المبدأ الأساسي
فحص المناعة هو فحص على مرحلتين (لأول مرة في الرحلان الكهربي للهلام ، ثم مناعي مناعي مع مضاد حيوي محدد ).
الخطوة الأولى من هذا المرض هي نفس الخطوة الخاصة بـ Electrophorisis للبروتينات (أو بروتيدوغرام) ، لذلك من الضروري تذكر بعض المفاهيم:
- الرحل الكهربائي هو تحليل مختبري يسمح بتحديد كمية البروتينات الموجودة في مصل الدم أو أي عينات بيولوجية أخرى ، ويكشف ، في كل جزء ، عن وجود أي شذوذ من حيث الجودة. على وجه الخصوص ، يسمح هذا الاختبار بفصل البروتينات إلى خمس مجموعات: الزلال ، الغلوبيولين ألفا 1 ، الجلوبيولين ألفا 2 ، غلوبولين بيتا وغلوبولين الجلبات . يتم تحديد هذا الأخير بشكل أكثر تحديدًا باستخدام immunofixation.
- الرحل الكهربائي هو طريقة فصل تعتمد على سرعة انتقال مختلفة للجسيمات المشحونة كهربائيًا ، من خلال محلول ووسط دعم خامل ، تحت تأثير مجال كهربائي ، يتم توليده بواسطة تيار مباشر. في الممارسة العملية ، يستغل الاختبار الشحنة الكهربائية والكتلة الجزيئية للبروتينات الموجودة في عينة المريض. تحت حافز حقل كهربائي ، فإن هذه الجزيئات الضخمة تهاجر و "تجمع" حسب النوع ، استجابة للإجهاد بطريقة مميزة. وتتكون النتيجة ( النمط الكهربي ) من القمم والمنحنيات المختلفة التي تتوافق معها أجزاء البروتينات. عادة ، تكون الذروة الأولى ، الأعلى والأضيق ، هي الألبومين . لمتابعة ، لوحظت قمم من الجلوبيولين ، أقل بكثير من الألبومين. تشير الزيادة أو النقصان في اتساع وشدة القمم التي تشكلت في التتبع إلى وجود أكبر أو أقل للبروتينات لكل فئة. كلما ازداد عدد البروتينات الموجودة في نطاق ، ارتفعت ذروة كل منها. في حالة غلوبيولين غاما ، إذا كنت تريد معرفة كمية كل من الفئات المختلفة (IgA ، IgM ، IgG إلخ) ، فستحتاج إلى اللجوء إلى الجرعة المفردة. بشكل عام ، كلما كانت الجلوبيولين الأكثر غاما موجودة في نطاق ، كلما ارتفعت ذروتها ؛ يقابل الارتفاع إجمالي كمية البروتينات التي تنتمي إلى فئة معينة.
يتوقع IMMUNOFISSAZIONE :
1) الأجروز الكهربائي للهلام: يتم ترسيب عينة المريض (المصل أو البول) في قطاع الكهربي ، أي دعم الهجرة (عادة هلام الاغاروز). من خلال تطبيق حقل كهربائي ، يتم توليده بواسطة تيار مباشر ، يتم الحصول على الفصل في نطاقات مختلفة. من الناحية العملية ، يهاجر كل نوع من غلوبولين الجل gام الموجود في الخليط (الموجود في عينة المريض) وفقًا للكتلة الجزيئية والشحنة الكهربية. إن الحركة الكهرومغناطيسية المختلفة لغلوبولينات جاما تجعل من الممكن تحديدها (يتزامن كل منها مع نطاق معين في مسار التحليل الكهربي) وللتعرف على أي حالات شاذة.
2) Immunoprecipitation مع Antisera محددة (التثبيت) : يتم إضافة المستضدات المحددة للجسم المضاد معين أو جزء (المضادة IgG ، ومكافحة IgA ، ومكافحة IgM ، كابا مضادة للضوء أو المضادة للسلسلة ) بشكل فردي إلى كل شريط الكهربي. سلسلة lambda الخفيفة). إذا كان هناك بروتين أحادي النسيلة ، فإن تفاعل المستضد مع الجسم المضاد المقابل سوف ينتج عنه نطاق ضيق (وهذا يعني أن النتيجة إيجابية) وتكوين راسب ، مرئي للعين المجردة أو تحت المجهر. وأخيرًا ، تتم معالجة العينة (أي غسلها وملونتها) لإزالة البروتينات التي لم ترسب ، للحصول على تجفيف الهلام ومتابعة قراءة النتائج.
لماذا نعم
ما هو Immunofixation ل؟
المصل المناعي هو اختبار يشير إلى تشخيص أو رصد الأمراض التي تتميز بتغيير غلوبولين الجلم ، خاصة عندما يتعلق الأمر بإنتاج المكون أحادي النسيلة ( اعتلال الغدد أحادية النسيلة ).
لمعرفة المزيد: الألعاب النارية أحادية النسيلة - ما هي وما هي؟يفيد التطعيم المناعي في حالات التشوش الخلقي المشتبه في وجوده وهو ضروري لدراسة MIELOMA (والأمراض ذات الصلة) و MGUS (اختصار لـ "gammapatie أحادي النسيلة من معنى غير مؤكد").
هذا الفحص يسمح أيضا لتقييم Waldenström macroglobulinemia والاميل النشوانية سلسلة خفيفة ( AL ).
المناعية: متى يتم وصف الامتحان؟
إن الإشارات إلى immunofixation تتابع النتائج السريرية أو المخبرية التي تثير الشك في حدوث تغييرات في الأجسام المضادة وحيدة النسيلة أو الغلوبولين المناعي في المصل أو البول.
على سبيل المثال ، يسمح هذا الاختبار بتعميق نتيجة الرحلان الكهربي seropro- أو البولية: عندما تكون في المسارات الكهربي ، فإن الحزم التي تقابل الغلوبيولين gamma تنحرف عن الحالة الطبيعية ، يحدد immunofixation أي من هذه البروتينات يتغير ، من حيث الكمية والجودة.
باختصار ، يمكن وصف المصل immunofixation:
- في حالة أن الاختبارات المعملية الأخرى توفر نتيجة غير طبيعية ، من حيث غياب أو انخفاض وكميات أعلى من بروتينات البلازما أكثر من المعتاد ؛
- عندما نشك بوجود أمراض تتميز بإنتاج مكون وحيد النسيلة ، مثل:
- المايلوما المتعددة ومتغيراتها ؛
- Waldenström macroglobulinemia؛
- الداء النشواني.
- عندما يكون المريض يعاني من أعراض وعلامات تؤدي إلى الاشتباه في وجود اعتلال غامض وحيدة النسيلة أو ورم نخاعي متعدد ، مثل:
- آلام العظام
- فقر الدم.
- التعب سهل.
- الالتهابات المتكررة
- كسور غير المبررة.
في حالة الورم النقوي المتعدد ، فإن الرحلان الكهربي والبروتينات immunofixation مفيدان أيضًا لمراقبة تقدم المرض (المتابعة).
المناعية: على أي عينات يمكن القيام بها؟
العينات البيولوجية التي يمكن إخضاعها لمناعة مناعية هي:
- المصل (المصل المناعي) ؛
- البول (immunofixation البولية)
- الخمور * (immunofixation الخمور).
* ملاحظة : السائل المخي الشوكي أو السائل هو السائل الذي يتخلل ويحمي الدماغ والحبل الشوكي والأعصاب القحفية والجذور الشوكية.
القيم العادية
تعتبر النتيجة السلبية للمصل والمصل المناعي للجينلوبولين جاما أحادية النسيلة أو متعددة النسيلة NORMAL .
نطاق Globuline
تشكل الجلوبيولينات غاما 9-20 ٪ من البروتينات البلازمية الكلية.
- القيمة المرجعية غلوبيولين غاما : 0.9-1.4 غ / دل
فيما يتعلق بالتركيز الكلي للغلوبولين المناعي ( IgG + IgM + IgA ) ، يعتقد أن القيم بين 600 و 2300 ملغم / ديسيلتر طبيعية.
- القيمة المرجعية Immunogobulin in serum :
- IgA : 90-400 mg / dl
- IgG : 800 - 1800 مغ / دل
- IgM : 60-280 مجم / دل
- IgD : 0.3-0.4 mg / dl
- IgE : 20-440 ملغ / دل
ملاحظة : قد تختلف الفاصل الزمني المرجعي للامتحان قليلاً حسب العمر والجنس والأجهزة المستخدمة في مختبر التحليل. لهذا السبب ، من الأفضل مراجعة النطاقات التي يتم الإبلاغ عنها مباشرةً في التقرير. وينبغي أيضا أن نتذكر أنه يجب تقييم نتائج التحليلات ككل من قبل الممارس العام ، الذي يعرف صورة المريض الأم.
القيم العليا - الأسباب
يمكن أن تكون الزيادة في الجلوبيولين غاما:
- Polyclonal ، إذا كان إنتاج الغلوبولين المناعي غير متجانس ، أي جميع مكونات مجموعة الغلوبيولين - المنتجة أو المشتقة من خلايا البلازما المختلفة - تتأثر بالزيادة ؛
- أحادي النسيلة ، عندما يتم إنتاج جلوبولينات جاما أو اشتقاقها من نوع واحد (استنساخ) لخلايا البلازما.
قد ترتبط الزيادة في نطاق الجلوبيولين متعدد السكل مع:
- الأمراض الالتهابية المزمنة.
- التهاب المفاصل الروماتويدي.
- الذئبة الحمامية الجهازية.
- الأمراض المزمنة للكبد (مثل التهاب الكبد وتليف الكبد) ؛
- الالتهابات الحادة والمزمنة.
- التطعيمات الأخيرة
- بعض أمراض السرطان.
قد تشير قيم جاما غلوبولين أحادية النسيلة العالية ، بدلاً من ذلك ، إلى وجود:
- بعض الأورام والتهابات مزمنة.
- ورم نخاعي متعدد
- سرطان الغدد الليمفاوية.
- Macroglobulinemia of Waldenström.
يسمى فائض الجلوبيولين الغاما hypergammaglobulinemia ، في حين يعرف نقص نقص الغلوبولين الدم .
القيم المنخفضة - الأسباب
قد يشير انخفاض الجلوبيولين في جاما إلى وجود أمراض وراثية مختلفة في الجهاز المناعي ، بما في ذلك الغاماغلوبولين الدم ، أو نقص المناعة الثانوي (مثل الإيدز والفشل الكلوي والإنتان الحاد ومتلازمة كوشينغ).
قد يتوقف انخفاض قيم الجلوبيولين في غاما أيضًا على تناول عقاقير تثبيط الخلايا ومثبطات المناعة والستيرويدات.
كيف الاداء
مناعية السيليوم
ينطوي المصل المناعي على رسم بسيط للدم من أحد الأوردة. يتم الحصول على مصل عن طريق الطرد المركزي للعينة البيولوجية. هذا يسمح ، في الواقع ، لفصل الكسر الذي يحتوي على الخلايا (جزء كوربوسكولار) من الجزء السائل من الدم (البلازما). مصل الدم خالٍ من عوامل تجلط الدم (الفيبرينوجين ، العامل الثامن ، العامل الخامس والبروثرومبين).
المناعية البولية
لإجراء عملية immunofixation البولية ، من الضروري جمع كمية صغيرة من البول في حاوية معقمة خاصة. وفقا لبيانات الطبيب والمختبر ، يمكن جمع العينة دون توقيت دقيق ( عشوائي ) أو في غضون 24 ساعة .
المناعي من الخمور
يتطلب التحليل إزالة كمية صغيرة من السائل الدماغي الشوكي ، عن طريق إدخال إبرة ، في تجويف العمود الفقري ( البزل القطني ).
إعداد
Immunofixation: كيفية التحضير للامتحان؟
- قبل أخذ عينات الدم ، قد تتطلب بعض المختبرات صيامًا لمدة 10-12 ساعة على الأقل. خلال هذه الفترة الزمنية ، يُسمح بتناول كمية صغيرة من الماء.
- يمكن إجراء عملية immunofixation على البول الذي يتم جمعه في وقت محدد من اليوم (عشوائي) أو خلال الـ 24 ساعة ، لذا من الضروري الحصول مسبقًا على حاويات معقمة مناسبة.
- أما بالنسبة لمناعة الخمور ، فلا حاجة إلى تحضير خاص.
ما الذي يمكن أن يغير نتيجة الامتحان؟
بعض الأدوية قد تؤثر على نتائج immunofixation ، لذلك فمن المستحسن إبلاغ الطبيب عن أي علاجات دوائية قيد التنفيذ.
في الأشهر الستة التي تسبق الفحص ، يمكن لإدارة اللقاحات (التحصين) واستخدام العقاقير ، مثل الفينيتوين ، بروكيناميد ، موانع الحمل الفموية والميثادون والعلاجات الغاما-غلوبولين ، أن تزيد من تركيز الغلوبولين المناعي. الأدوية الأخرى التي يمكن أن تغير نتيجة الاختبار هي الستيرويدات القشرية ، النيومايسين ، حمض أسيتيل الساليسيليك و الكلوربرومازين.
تفسير النتائج
يتم تقييم نتيجة immunofixation جنبا إلى جنب مع نتائج التحليلات الأخرى. إن تفسير الاكتشاف يرجع إلى الطبيب العام أو الأخصائي المرجعي الذي يمكنه التعرف على التغيرات في غلوبيولين غاما محددة والإبلاغ عنها (على سبيل المثال ، النطاق الذي يتزامن مع الغلوبولين المناعي G) مع بعض الأمراض. يؤكد هذا التقييم أو يدعم فرضية التشخيص: بشكل عام ، يمكن أن يكشف immunofixation عن غلوبولين طبيعي أو يحدد بروتين أحادي النسيلة أو نموذج polyclonal .
حالما يتم تعريف المرض ، يمكن إجراء immunofixation إلى:
- راقب المرض بمرور الوقت ، ثم اتبع الدورة (المتابعة) ؛
- تحقق من فعالية البروتوكول العلاجي .
إيجابيات وسلبيات من immunofixation
بالمقارنة مع الرحلان الكهربي ، البروتينات المناعية:
- هو أسرع : عادة ما يتم الحصول على نتائج immunofixation في غضون ثلاث ساعات.
- وهو أكثر حساسية (ولو بشكل طفيف): يمكن أن يكشف المناعة عن الغلوبولين المناعي المستبعد من الرحلان الكهربي ، خاصة عند التركيزات المنخفضة (أقل من 1 جرام / لتر).
وعلاوة على ذلك ، مناعة immunofixation:
- يمكن أن يكون آليًا جزئيًا ؛
- يمكن قراءتها بسهولة وتفسيرها .
ومع ذلك ، فالمناعة المناعية هي أغلى من البروتين الكهربائي ، ولا تسمح إلا بتحليل غلوبولين الغاما .
نتيجة طبيعية
في Immunofixation ، يشتمل المسار الطبيعي على:
- فرقة تتزامن مع الغلوبولين المناعي الغامق G ( IgG ) ؛
- عصابة المقابلة للغلوبولين المناعي A ( IgA ) ؛
- غياب الفرقة عن الغلوبولين المناعي M ( IgM ) ؛
- إن فرقة الكبابا أكثر كثافة من نطاق لامدا (السلسلة الخفيفة) ، بنسبة 2: 1.
في النتيجة العادية ، تكون العصابات كبيرة ويوجد تخفيض تدريجي وموحد في كثافة اللون باتجاه حواف شريط العزل المناعي.
Polyclonal gamma globulins
في بعض الحالات ، يتم حجب جميع العصابات من immunofixation بشكل متجانس إلى نفس المدى. هذا النموذج يمثل وجود الغلوبولين المناعي المتعدد النسيلة . أيضا في هذه الحالة ، تكون الأشرطة كبيرة والانتقال إلى حواف الشريط المناعي الكهرومغناطيسي تدريجيًا. فرقة IgM - غائبة عادة - واسعة.
جاما جلوبيولين أحادي النسيلة
عندما يمكن تحديد نطاق ضيق مع حواف حادة في مسار immunofixation ، فهذا يعني أن البحث عن مكونات وحيدة النسيلة إيجابي .
التعرف على مناعي وحيد النسيلة مفيد في تشخيص الحالات التالية:
- الاعتلال الغشائي أحادي النسيلة لدلالة غير محددة (MGUS) ؛
- ورم نخاعي متعدد
- Waldenstrom macroglobulinemia؛
- الداء النشواني.
وعلاوة على ذلك ، يمكن استخدام immunofixation لرصد العلاج في خلل في خلايا البلازما (أي الورم النخاعي المتعدد و Waldenstrom macroglobulinemia). إذا انخفض مستوى البروتين أحادي النسيلة أو لا يمكن اكتشافه بعد العلاج الكيميائي ، فقد يشير ذلك إلى استجابة للعلاج . وعلى النقيض من ذلك ، فإن وجود بروتين أحادي النسيلة على الرغم من العلاج يعد علامة على وجود مرض حراري .
ملاحظة . نتيجة سلبية في immunofixation لا يستبعد دائما dyscrasule plasmacellule. على سبيل المثال ، يمكن للعديد من المايلوما متعددة غير إفرازية أو النخاعين أن تعطي نتائج سلبية في كل من البول والمصل. لذلك ، إذا كان الشكوك التشخيصية للإصابة بالاعتلال الغامض لا تزال مرتفعة ، فإن تحديد نسبة سلاسل Light Kappa / Lambda Libere ( نسبة K / L ) هو محدد.
علم المناعة والتشخيص من التصلب المتعدد
يتم وصف المناعة المناعية للسائل النخاعي (CSF) عندما يشك الطبيب بوجود التصلب المتعدد . في هذه الحالة ، يكون التتبع الذي يتم تحديده مميزًا ، لأنه يسلط الضوء على وجود ما يسمى بشرائط oligoclonal . يتم الإبلاغ عن النتيجة في نتائج المختبر على أنها إيجابية . يجب أن نعتبر أن العصابات لا تلاحظ عادة في المصل المناعي ، لأنها ترتبط مع إنتاج الجلوبيولين غاما داخل القراب .
ومع ذلك ، تجدر الإشارة إلى أن هذه النتيجة لا تؤكد بالضرورة التشخيص ، كما قد تظهر ظروف أخرى مع عصابات oligoclonal في السائل النخاعي.
وبعبارة أخرى ، فإن تحديد العصابات oligoclonal مع immunofixation من الخمور مفيد جدا لدعم تشخيص مرض التصلب المتعدد ، ولكن يجب أن تؤكده التحقيقات الأخرى . الحالات الأخرى التي قد توفر مثل هذه النتائج هي التهاب الجهاز العصبي المركزي ، بما في ذلك: التهاب الدماغ المتعلق بفيروس نقص المناعة البشرية ، الزهري العصبي ، العصبي ، التهاب السحايا اللمفي ، الأورام الخبيثة CNS ، التهاب العصب البصري العصبي والتهاب النخاع المستعرض.
